L'immunobuvardage de type Western (Western blot) est une mesure semi-quantitative de l'expression des protéines.
Cette technique peut nous informer sur:
- l'activation de voies de signalisation cellulaires (phosphorylation de voies spécifiques),
- l'induction de marqueurs apoptotiques (clivage de la PARP, activation des caspases et libération de cytochrome c) ou
- la modification de l'expression de protéines cibles (récepteurs ou facteurs de transcription).
Brièvement, la mesure de l'expression protéique consiste en quatre étapes distinctes :
- l'extraction des protéines totales, cytoplasmiques ou nucléaires;
- la séparation électrophorétique des protéines sur un gel d'acrylamide;
- leur transfert sur une membrane de PVDF et
- l'immunobuvardage de la membrane avec l'anticorps spécifique à la protéine choisie.
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